價(jià)格
電議
型號(hào)
FS-R7740
品牌
撫生
所在地
暫無
更新時(shí)間
2023-05-22 09:44:35
瀏覽次數(shù)
次
其他推薦產(chǎn)品
首頁(yè)| 關(guān)于我們| 聯(lián)系我們| 友情鏈接| 廣告服務(wù)| 會(huì)員服務(wù)| 付款方式| 意見反饋| 法律聲明| 服務(wù)條款
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于*次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定*篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。
1) *天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)*;注:對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
僅供科研實(shí)驗(yàn)、不得用于臨床
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號(hào)
茚三酮乙醇溶液
100ml
FS-R7740
分類:生化檢測(cè)
儲(chǔ)存條件:室溫,避光,6個(gè)月
用途:用于茚三酮反應(yīng)或?qū)嶒?yàn),定性蛋白質(zhì)
注意事項(xiàng):蛋白質(zhì)與茚三酮反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)紫色的還原茚三酮。
標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標(biāo)簽。
2 。在校正前,準(zhǔn)備ORP標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分?jǐn)嚢琛?/span>
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分?jǐn)嚢琛?5。 ORP標(biāo)準(zhǔn)液保存期為72hour。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
小鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL硫酸新霉素質(zhì)量規(guī)格:≥600 I.U. /mg,USP,BRNeomycin sulfate
LLC小鼠Lewis肺癌細(xì)胞 LLC mice with Lewis lung cancer cells DMEM+10%FBS硫酸新霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定Neomycin sulfate
IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL12B / IL-12B 蛋白尼羅替尼(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Nilotinib
TE-10(人食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 HCC1428(人癌細(xì)胞)螺旋霉素質(zhì)量規(guī)格:>3900IU/MG,EP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Spiramycin
CM-M052小鼠子宮平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL螺旋霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)品Spiramycin
倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A 肺癌細(xì)胞,LLC Lewis細(xì)胞 PCK細(xì)胞,大黃魚腎細(xì)胞拉羅皮蘭,MK0524質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRLaropiprant,MK-0524
人葡萄膜色素細(xì)胞;UM鹽酸頭孢噻呋質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCeftiofur hydrochloride
THPO Others Cynomolgus 食蟹猴 Thrombopoietin / THPO / TPO 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸頭孢噻呋(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定Ceftiofur hydrochloride
食管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)扎魯司特質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRzafirlukast
DMP1 Others Human 人 DMP1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 阿昔洛韋鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Acyclovir
茚三酮乙醇溶液HPAC細(xì)胞,人胰腺腺泡上皮癌 人舌癌細(xì)胞,T6細(xì)胞 雜交瘤(B類);C3110D2E11梣酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Fraxinellone質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
JEG-3(人絨毛膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2茶黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)Theaflavin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Promocell C-25010 Hepatocyte Growth Medium, 肝細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml茶黃素-3'-沒食子酸酯Theaflavin-3'-gallate質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
人間充質(zhì)干細(xì)胞(骨髓)cDNAHMSC-bm cDNA茶黃素-3-沒食子酸酯Theaflavin-3-gallate質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
FAP Others Human 人 FAP / Seprase 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 柴胡皂苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)Saikosaponin A質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,*將細(xì)胞稀釋至豐度不過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。