中文名稱：Annexin V-kFluor594細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(熒光顯微鏡)

英文名稱：Annexin V-keyFlour594 Apoptosis Detection Kit

產(chǎn)品規(guī)格：10T|20T|50T|100T

發(fā)貨周期：1～3天

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及*濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時(shí)提供*價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

細(xì)胞培養(yǎng)方法：

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

62687-22-3野菊花內(nèi)酯 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg

15085-71-9小蕓木素 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg

550-24-3酸藤子酚 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

67400-17-3(S型)人參皂苷Rh2 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

2673-40-7派利文堿 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

490-79-9龍膽酸 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

 規(guī)格： HPLC≥98%;0.2ml

25712-94-1高熊果酚苷 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg

3,6-O-二啡?？鼘幩?規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

60132-35-6臭靈丹二醇 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

83905-01-5阿奇 規(guī)格： HPLC≥98%;100mg

白頭翁皂苷E-1 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg

Annexin V-kFluor594細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(熒光顯微鏡)電鏡脫鈣液  100ml|500ml

脫鈣后堿處理液  500ml

抗酒石酸酸性磷酸酶染色液  3×10ml|3×20ml

酸性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)  3×10ml|3×20ml

β-半乳糖苷酶染色試劑盒(細(xì)胞)  100T

β-半乳糖苷酶染色試劑盒(組織)  100T

細(xì)胞色素氧化酶染色液(對苯二銨法)  4×50ml

脫鈣終點(diǎn)檢測試劑盒(化學(xué)法)  100T

蔗糖-PBS溶液(5%)  500ml

甲酸水溶液(10%)  500ml

蔗糖-PBS溶液(10%)  500ml